dna聚合酶的三种聚合速度DNA聚合酶1: 1.能催化单个脱氧核糖核苷酸连接到DNA链的3'端. 2.能沿5'端到3'端方向外切DNA(切除引物) 3.能沿3'端到5'端方向外切DNA(纠错,或者说DNA损伤的恢复) DNA聚合酶2: 1.发挥作用需要镁离子和铵根离子存在 2.同样能参与DNA聚合酶1参与的反应,但聚合活性低 3.能沿3'端到5'端方向外切DNA DNA聚合酶3: 1.主要负责DNA链的延伸 2.能沿3'端到5'端方向外切DNA 在DNA的复制中,DNA聚合酶3负责合 聚合酶链式反应要经过三个阶段原理就是DNA半保留复制吧 过程只要记住 1.DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA 2.退火(25℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。 3.延伸(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右,活性最佳)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补的DNA链。 还有就是体外快速DNA复制 还有就是PCR反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液(其中需要Mg2+)。 个人觉得这些才是重点 什么属于不对称聚合反应不对称式聚合酶链反应是指引物用量不对称的聚合酶链反应。这两个引物分别称为非限制与限制性引物,反应中当低浓度的限制性引物消耗完后,高浓度的非限制性引物就引导产生大量的单链DNA。 利用针对目的基因所设计的一对特异寡核苷酸引物,以目的基因为模板进行的DNA体外合成反应。 |