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本篇文章给大家谈谈猪病怎么做pcr，以及pcr技术五个步骤？对应的知识点，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。 今天给各位分享猪病怎么做pcr的知识，其中也会对pcr技术五个步骤？进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！ 1、pcr技术五个步骤？pcr的五个步骤分别是：1、预变性，2、变性，3、退火，4、延伸，5、彻底延伸。一般步骤一的时间根据试剂说明书中的说明设置时间，主要是模板的变性和taq酶的激活是，该步只有起始时一步，2、3、4三个步骤是一个循环，一般qpcr中是设置35-40个循环。第五步彻底是在2、3、4步骤的循环数跑完后进行，一般是5min。 2、pcr四个步骤？1.在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。10×PCR buffer5 μl dNTP mix （2mM）4 μl 引物1（10pM）2 μl 引物2（10pM）2 μl Taq酶 （2U/μl）1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）1 μl 加ddH2O至 50 μl视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，最后在72℃ 保温7min。3.结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。4.PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测 3、PCR青霉素对猪阳性野毒有用吗？有用，青霉素主要抑制革兰氏阳性菌，另外对革兰氏阴性球菌也有效果。在猪场一般应用于猪丹毒、肺疫、恶性水肿、腹膜炎、乳房炎、脓肿、呼吸道感染、钩端螺旋体、放线菌及败血症等病； 到此，以上就是小编对于猪病怎么做pcr的问题就介绍到这了，希望介绍关于猪病怎么做pcr的3点解答对大家有用。 |
