取1块耳组织(约10毫克)置于1.5毫升离心管内,用小剪刀将其剪碎。加人0.4毫升组织DNA提取液[50毫摩/升Tris-Cl溶液(pH8),100毫摩/升一EDTA溶液(pH8),100毫摩/升氯化钠溶液,1%SDS溶液],再加人蛋白酶K至终浓度100微克/升,55C水浴消化过夜。加入RNase至终浓度20纳克/毫升,37X:温育1小时。用苯酚和1:1苯酚、氯仿溶液各抽提1次,每次以12000转/分处理10分钟,将其上清液移到另一离心管中。加入1/10体积3摩/升NaAc(pH5.2),混匀后加人2倍体积的无水乙醇沉淀DNA,将DNA絮状沉淀挑入新离心管中,并用70%乙醇洗1次,真空抽干乙醇。以适量TE溶液或灭菌双蒸水溶解DNA。 |