|
一、非洲猪瘟的特点 二、非洲猪瘟疫苗开辟的普通流程和主要艰难 非洲猪瘟疫苗开辟主要艰难(雷建林等2019) 2.1 遗传多样性 目前，依据 p72 基因 (B646L) 末端核苷酸的差异， 可将 ASFV 分为24 个基因型，基于病毒是否会引起红细胞吸附的特性，已鉴定出至少有 8 个血清群。 2.2 免疫保护机制不清晰 2.3 结构重杂，基因组硕大为170-190kb，功能性蛋白超过两百个 2.4 可选择的入侵方式：ASFV 可通过受体介导的内吞作用或非特异性的巨胞饮作用入侵靶细胞。 2.5免疫躲藏：ASFV 主要靶向单核-巨噬细胞系统，通过抑制细胞凋亡、宿主免疫应答等策略逃逸宿主免疫防御系统。 2.6 疫苗开辟濒临的另外难题：基因缺失疫苗被以为是短期内最有希翼开辟成功的疫苗，具有同源保护作用，也能反抗异源毒株的攻击，但存在安全隐患，进一步鉴定及敲除毒力基因后具有很大应用前景然而，该类疫苗在商业化的进程也濒临诸多挑战：1) 需建立区辞疫苗免疫与野毒感染的 (Differentiating infected from vaccinated animals， DIVA) 诊断主意;2) 需构建病毒稳定表示的细胞系，原代单核-巨噬细胞仅限于实验室对 ASFV 生物特性与免疫原性的研究，不适合用于疫苗批量生产，另外易感细胞传代后病毒简单变异;3) 需建设安全的病毒操作平台， ASFV 致病性、攻毒模型、免疫效力评价需在动物生物安全三级 (ABSL3) 以上实验室进行;4) 安全性及免疫原性评价周期较长，基因缺失疫苗专利申请及兽药证书的审批需要严厉评估程序，确保毒株在宿主及环境中安全、遗传稳定，且免疫效力不受影响。 三、十一种在研非洲猪瘟疫苗的比较 1 类型：减毒活疫苗 构建策略：MGF360-505R缺失和CD2v与MGF360-505R联合缺失 基因型：Ⅱ，我国 毒株：Pig/CN/HLJ/2018 构建单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 效果：能提供对非洲猪瘟中国流行强毒株的100%免疫保护，可作为安全和有效的防控中国非洲猪瘟疫情的疫苗，具有极大的社会价值。 研究阶段：截至8月，临床中试 2 类型：减毒活疫苗 构建策略：CD2v和 MGF 基因 基因型：Ⅱ，我国 毒株：SY18 构建单位：军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所 效果：接种猪能够100%反抗亲本毒株SY18株的攻击 研究阶段：安全有效评价 3 类型：亚单位疫苗 构建策略：2018年分离的沈阳毒株CD2v蛋白出发，经剪切优化后，用CHO细胞表示系统表示了重组CD2v蛋白。 基因型：Ⅱ，我国 毒株：SY18 构建单位：青岛易邦生物工程有限公司 效果：本发明的表示非洲猪瘟CD2v蛋白细胞株，表示量高易于纯化，可用于鉴辞诊断，为生产非洲猪瘟亚单位疫苗和诊断试剂奠定了坚实的基础。 研究阶段：构建尽成，具体不详 4 类型：亚单位疫苗 构建策略：在SF9细胞中表示非洲猪瘟CD2v蛋白的重组杆状病毒 基因型：Ⅱ，我国 毒株：SY18 构建单位：青岛易邦生物工程有限公司 效果：本发明的表示非洲猪瘟CD2v蛋白细胞株，表示量高易于纯化，可用于鉴辞诊断，为生产非洲猪瘟亚单位疫苗和诊断试剂奠定了坚实的基础。 研究阶段：构建尽成，具体不详 5 类型：减毒活疫苗 构建策略： 通过不同的转染质粒构建不同的缺失突变体p72DA224LGUS10T, p72DA238LGUS10T和 p72DEP153RGAL10T 在COS7细胞系， 和p72D276RRGAL10T 在PAM细胞系 基因型：I，西班牙 毒株：NH/P68 构建单位：CSIC-UAM 效果：不同的缺失突变体对Arm07毒株有一定程度的保护作用，能够减少临床症状的程度 研究阶段：安全有效评价 6 类型：减毒活疫苗 构建策略：EP402R基因的单核苷酸缺失造成ORF移码，提前产生终止密码子 基因型：Ⅱ，西班牙 毒株：Lv17/WB/Rie1 构建单位：马德里动物健康研究中央;马德里康普顿斯大学 效果：口服使用，对野猪Arm07毒株的感染的防止保护力为92% 研究阶段：安全有效评价 7 类型：减毒活疫苗 构建策略：缺失特异性毒性相关的9GL(B119L)和UK(DP96R)基因 基因型：Ⅱ，美国 毒株：Georgia 2007 构建单位：美国农业部 效果：在体内，甚至在相当高的剂量下( 106HAD50 )对猪肌内施用ASFV-GΔ9GL/ΔUK也不会诱导疾病。重要的是，在感染28天后使用毒性的亲本毒株Georgia 2007攻击时，使用104或106HAD500感染的动物稳定地受到保护而免于临床疾病的表现。 研究阶段：安全有效评价 8 类型：减毒活疫苗 构建策略：缺失：多基因家族360基因9L，10L，11L，12L，13L和14L; 和多基因家族505基因1R ，2R ，3R和4R。缺失DP148R基因 基因型：Ⅱ，英国 毒株：OURT88/3是来自葡萄牙的ASFV的非致病性分离株 构建单位：皮尔布莱特研究所 效果：本发明人已经发明，与肌内赠药相比，鼻内施用减毒的ASF病毒在较低的剂量下是有效的。疫苗可以在初免-加强方案后施用。例如，在首席次接种后，受试者可以在一段光阴(例如约7，14，21或28天)之后接受第二次加强施用。通常，加强施用的剂量高于初免施用的剂量。 研究阶段：安全有效评价 9 类型：减毒活疫苗 构建策略：不详 基因型：Ⅱ，越南 毒株：不详 构建单位：越南国立农业大学 效果：在实验室和越南北部的三个农场使用效果良好 研究阶段：安全有效评价 10 类型：核酸疫苗 构建策略：将重组K205R-IRES-A104R-IRES-E183L基因衔接至pMD19-T载体，将亲本质粒转化感受态细胞，扩增后提取质粒即克隆质粒，在克隆质粒中提取目的片段;将目的片段进行体外转录即得mRNA。 基因型：不详，我国 毒株：不详 构建单位：四川农业大学 效果：不详 研究阶段：尽成了构建，后续工作不详 11 类型：重组腺病毒 构建策略：非洲猪瘟EP153R与P54基因共表示的重组腺病毒载体构建及腺病毒包装 基因型：不详，我国 毒株：不详 构建单位：扬州大学 效果：不详 研究阶段：尽成了构建，后续工作不详 以上都为从公开资讯获得的材料，图片来源于源文件，不蕴藏另外在研但未公开的内容。 对于是否使用商业化的疫苗目前在我国业界依然存在一定的争议，同时对于临床上流行的各种所谓的“疫苗”大家需要擦亮双眼，避免上当受骗遭受双重损失，目前尚无任何一种非洲猪瘟疫苗商业化，即使到时有商业化的疫苗，对于不同的所谓的“疫苗”毒株，和不同类型的野毒株之间都需要进行鉴辞诊断，选择针对性的主意，避免不必要的损失。
|
