根据特征性病理变化和3-5日龄以内的初生仔猪大批发病，泄泻黄色水样稀粪，剖检肠黏膜有急性卡他性炎症，就可作出初步诊断；确诊可进行实验室检查，除采用涂片镜检、分离培养和生化试验等常规方法外，还应测定其有无肠毒素及吸着因子。

　　若从病死猪肠内容物和粪便中分离出致病性大肠杆菌，而且证实大多数菌株具有黏着素K抗原和能产生肠毒素，则可确诊。

　　肠毒素的测定方法很多，有兔肠段结扎试验、小鼠肠袢试验、皮肤毛细血管通透性亢进试验、乳鼠灌胃试验、细胞培养、Y1腺瘤细胞和中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的形态变化测定、琼脂扩散(Elek)法、被动免疫溶血法、ELISA、基因探针法等。

　　兔肠段结扎试验和小鼠肠袢试验使用广泛，是普遍使用的测定肠毒素活性的好方法，但操作较繁琐。

　　乳鼠灌胃试验是目前测定ST的唯一方法。

　　基因探针法很敏感，是目前最先进的方法，但因标记DNA的探针半衰期短，价格贵，不易推广。

　　ELISA很敏感，易于推广。